这次给大家介绍一个特别实用的荧光淬灭剂——BHQ-2 NHS。它的全名是 Black Hole Quencher-2 N-羟基琥珀酰亚胺酯，CAS号是916753-62-3。这个东西在分子生物学、生物医学研究还有生物检测这些领域用得特别多。BHQ-2 NHS的核心结构是深紫色粉末，溶解性挺有意思，易溶于DMSO或者DMF这些有机溶剂，但是在水里就难溶一些。不过在给生物分子做反应的时候，通常是先拿有机溶剂溶解它，再稀释到水相体系里去。 说到稳定性，它的光稳定性特别好，耐光漂白能力强，特别适合做长期实验或者探针构建。热稳定性也还行，常规储存条件下都挺稳定的，不过高温就得避免。需要注意的是它的NHS活性酯基团特别怕水，一遇水就容易水解失效，所以操作的时候必须严格无水环境。 BHQ-2 NHS最厉害的地方在于它的高效荧光淬灭能力。它的吸收波长范围很宽，550到650纳米都能覆盖，最大吸收波长大概在579纳米左右，消光系数也很大。这意味着它能把绿色到橙红色的荧光染料（像FAM、TAMRA、ROX、Texas Red这些）的荧光信号高效地淬灭掉。所以如果你想构建低背景、高信噪比的FRET体系，BHQ-2 NHS绝对是个好帮手。 它的化学修饰性也很强。NHS活性酯基团在中性到弱碱性的环境下（pH7.0到8.5），能和生物分子里的伯氨基迅速反应生成稳定的酰胺键。这个过程不需要金属催化剂就能完成标记，反应特异性特别好，副产物也少。 柔性连接臂的设计很巧妙，既保证了NHS酯的反应活性，又让BHQ-2和荧光团之间有个最合适的空间距离，这对提升FRET效率特别有帮助。 标记完之后不会影响生物分子的结构和功能活性，所以体内外的生物实验都能用得上。 使用的时候有几个注意事项：储存要避光密封放在-20℃干燥处保存，千万别反复冻融，不然容易水解和降解。 偶联反应通常是在中性到弱碱性的缓冲液里进行的，比如PBS pH7.4或者碳酸氢钠缓冲液pH8.3到8.5。要避免长时间泡水或者碰到强酸碱环境。 用之前得先拿无水有机溶剂（像DMSO）把试剂溶成高浓度母液再稀释到反应体系里去。 最后再提醒一下大家：这东西仅供科研使用！不能用在人体或者动物临床实验上哦！操作的时候记得戴手套和护目镜，别直接碰皮肤或者吸入粉末。 顺便提一下相关产品：还有Hochest-SiRBHQ-1 acid、BHQ-1 amine、BHQ-1 azide、MalBHQ、MalBHQ-1、NH这些呢！