在神经科学的研究里,搞清楚烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)怎么分布、怎么变化,对咱们搞懂神经肌肉接头(NMJ)怎么长、突触咋变以及生病的机理特别重要。AF532、AF546、AF568这三个颜色的探针就被设计出来,专门用来精确看看这些受体到底在哪,怎么动。 咱先看这个试剂,中文叫AF532标记的α-Bungarotoxin,其实就是Alexa Fluor 532-α-Bungarotoxin。这东西发出的光最亮的时候是在554纳米,用532纳米的光去照就能看见。纯度也很高,达到了95%,看起来像个固体,能轻松溶在DMSO或者DMF这类有机溶剂里,稍微有点难溶在水里。平时得把它密封起来藏在暗处,最好放在像-20°C这么冷的地方存着,以防它受潮或者失效。包装的话有1mg、5mg、10mg这种规格。 这个试剂的作用就是结合了α-银环蛇毒素那种特别准的靶向本事,还有Alexa Fluor 532那超好的光学效果。要想准确画出神经肌肉接头的样子,用这个最经典、最可靠了。比如在骨骼肌的切片或者铺片上,AF532-α-银环蛇毒素就能把突触后膜上的nAChR聚集区清清楚楚地勾勒出来,看着像一条条带子或者一个个斑块。要是研究发育的过程,比如神经肌肉接头是怎么长出来、变成熟、再重新变样子的,也离不开它。 因为AF532发出来的是橙色的光,所以很方便和别的颜色一起用做多重成像。比如可以和突触囊泡蛋白SV2、神经丝蛋白Neurofilament或者突触素Synaptophysin这些抗体一块儿染色(通常它们用AF488或者AF647标记),这样就能同时看到突触前和突触后的情况。还能和鬼笔环肽Phalloidin一起染细胞骨架(它们常被做成AF488或者AF647的形式),看看肌纤维的结构怎么样。最后再配合DAPI染个核标个蓝颜色就行。 最厉害的是它跟受体结合基本是不可逆的,而且对细胞没啥大伤害。所以既可以用在培养的肌管细胞上搞活细胞成像,观察受体是怎么聚集成簇、被吞进去再跑出来循环的;也能拿新鲜切好的肌肉组织切片来做急性活染,这样就更接近身体里的真实状态了。 最后再给大家看看咱们公司还有些啥相关的东西:比如AF594-Concanavalin、ABG-Alexa Fluor 647、AF790 NHS Ester、AF633 C5 Maleimide、AF 660 WGA、Streptavidin AF555 conjugate、Streptavidin AF568 conjugate、AF 555 WGA、AF532 NHS Ester、AF488-TSA还有AF488 tyramide这些都有了。