Alexa Fluor 555(AF555)标记的转铁蛋白兼容免疫荧光实验,橙红色的荧光能给研究铁代谢、追踪受体动态及观察内体酸化过程提供很大帮助。这类产品通常以固体形式在-20℃下避光保存,pH 7.2的环境中性质稳定,适合用于免疫荧光、流式细胞术还有共聚焦显微镜等研究。 AF555是基于磺化罗丹明衍生物制成的染料,里面有磺酸基团,水溶性非常好,在pH 4到10之间都很稳定,消光系数达到155,000 cm⁻¹M⁻¹,发射波长在565 nm左右,呈现橙红色荧光。它跟Cy3、TRITC在光谱上类似,但光稳定性更好。AF555与转铁蛋白的结合是通过NHS酯在弱碱性条件下实现的。这个反应需要碳酸氢钠缓冲液调pH到8.3,室温或者37℃孵育1小时,染料和蛋白质的摩尔比控制在1:1到5:1之间。经过纯化之后,回收率通常在60%到90%之间。 转铁蛋白本身是单体糖蛋白,大约有80 kDa大,携带两个铁离子结合位点。当它通过CD71这样的受体结合到细胞表面后,会通过网格蛋白介导的内吞进入细胞内。进入酸性内体后会释放铁离子,然后空载的转铁蛋白会循环回到细胞膜上重新利用。 标记后的转铁蛋白依然保留了结合铁离子和与受体结合的活性,能模拟天然转铁蛋白的运输路径。比如在内体酸化的过程中释放铁离子,还有受体循环等机制都能被追踪到。 Alexa Fluor 555 Transferrin具有高亮度、良好的光稳定性和抗淬灭性,适合长时间观察活细胞。它的发射波长和常见的激光通道(如532/561 nm)兼容,可以跟绿色或红色染料一起做多色成像。 在生物应用方面,这种荧光试剂能用来研究铁代谢过程,比如追踪转铁蛋白的运输路径和解析铁离子释放机制。也可以定量分析受体动力学,比如CD71的结合亲和力和内吞速率。在寄生虫或肿瘤等铁代谢异常的疾病模型中标记效果也很好。它还适用于流式细胞术、共聚焦或超分辨显微镜、FRET实验等多种检测手段,支持固定和活细胞成像以及组织切片染色。 相关的试剂还有Di-4-ANEPPS电位探针、BDP 630/650-X-NHS酯、TAMRA酰肼6异构体、ROX叠氮化物5异构体、sulfo-Cyanine5.5马来酰亚胺、Cyanine5.5羧酸、DiA亲脂性示踪剂、TODi-1绿色荧光核酸染料、BDP 630/650叠氮化物、ROX DBCO 5异构体、TAMRA叠氮化物5异构体、sulfo-Cyanine3四嗪、BDP FL胺、BDP 650/665马来酰亚胺、Cyanine7.5胺、BDP 581/591炔烃、FAM酰肼5异构体、BDP TMR胺、BDP FL叠氮化物、YODi-1绿色荧光核酸染料、AF 430马来酰亚胺和Cyanine3 DBCO。这些产品都由陕西新研博美生物科技有限公司木南整理提供。