CAS为146368-11-8的是Cyanine5 NHS酯，简称CY5-NHS。这类CY5活化脂可以通过EDC和NHS的催化作用，把含有氨基的生物分子给结合上去。还有水溶CY5活化脂，里面的磺酸基可以让分子直接溶解在PBS这种水性缓冲液里。Cyanine5 NHS酯加上羧基就成了CY5-COOH，给它再引入磺酸基团就变成了Sulfo-Cy5 COOH。这些产物的荧光核心是三甲川花菁染料，发射波长是570 nm，正好跟流式细胞仪等设备的检测通道配得上。 把磺酸基加进去能显著提升水溶性，减少非特异性吸附，这样活细胞成像的时候背景干扰就低了。羧基的作用是提供活性反应位点，能和蛋白质、抗体里的氨基形成稳定的共价键。这种酰胺化反应条件很温和，特别适合复杂的生物体系。因为有磺酸基团的帮忙，水溶性很好，既不容易沉淀也不容易聚集。像FITC和CY5这类荧光染料都可以搭配使用，实现多色标记。 Sulfo-Cy3 COOH也是基于Cy3的荧光试剂，它的结构里既有磺酸基（-SO₃⁻）也有羧基（-COOH）。核心特性上，它发射橙红色荧光，量子产率高且光稳定性强。磺酸基团让分子能直接溶在水里，生物相容性也好。羧基提供了活性位点，可以给生物分子做特异性标记。 操作的时候要注意避光、干燥、低温保存，现配现用。酰胺化反应要控制EDC和NHS的浓度及反应时间，反应完得透析或者纯化一下。防护装备必须戴好，不能用于临床治疗。 除了Cy3的产品，还有CY3.5的酰肼和叠氮。Cy5除了氨基和羧基形式外，还有炔基和叠氮形式。不管是水溶还是不水溶的版本都有对应的活性基团供选择。