做分子生物学实验,尤其是跟RNA打交道的时候,无RNase的1M DTT溶液是个不可或缺的好帮手。DTT,也就是Dithiothreitol,是个强力还原剂,很多研究比如RNA测序、蛋白电泳还有DNA提取都用得上。为了不让RNA被那些无处不在的RNase破坏掉,准备好无RNase的DTT溶液特别关键。这溶液能保护核酸和蛋白质的结构不被破坏,所以在RNA提取时经常用来配成10mM或者100mM的浓度去干活,还能把蛋白质里的二硫键打断,让蛋白变性好做电泳。 不过这东西有点娇气,溶液颜色会从无色变成淡黄色,一旦变色说明它的力气变小了就得重新配。而且操作的时候得小心,用的移液器吸头和离心管都得是无RNase的,别蹭到有污染的地方。虽然DTT比巯基乙醇的毒性低点,但戴手套和实验服还是必须的。制备的时候流程虽然简单,但必须做到绝对无菌无污染。 只要严格按照步骤来保存,就能保证DTT的还原性。下游实验比如RT-PCR或者RNA测序的数据质量全靠它撑着了。